Psi2 DAP(小鼠胚胎成纤维细胞)

细胞名称：Psi2 DAP     小鼠胚胎成纤维细胞

组织来源：正常胚胎

培养条件：DMEM +10% FBS

形　　态：贴壁；成纤维细胞

背　　景：这株细胞生成一种可以感染小鼠细胞的载体。 Psi2 DAP细胞生成的载体编码了人类胎盘碱性磷酸酯酶基因和新霉素抗性基因。 这株细胞通过Psi2细胞插入一个重组的逆转录病毒(DAP)基因组衍生而来。 被这种Psi2 DAP产生的载体感染的细胞表达的磷酸酯酶可用组织化学方法检测，可以用作体内追踪他们命运的标记。 这些细胞也可能产生辅助病毒。

Psi2 DAP(小鼠胚胎成纤维细胞)操作说明：

1)对于常温运输的细胞，收到细胞后，检查是否有运输问题，即细胞培养瓶或管是否破损，细胞培养液是否溢出。若没有运输问题，请75%酒精消毒后，保留封口膜，放入细胞培养箱中静置。严格检查培养箱的参数：温度，湿度和CO2浓度。细胞静置时间一般为6-12小时后，细胞状态稳定后，即可开始后续操作。选用正确的细胞培养体系，Psi2 DAP(小鼠胚胎成纤维细胞)严格按照说明书的培养条件进行培养。条件允许，培养的前三天内做细胞拍照记录，通过邮件发送给我们做及时状态跟踪。

2)对于干冰运输的细胞，请取出冷冻管后，须立即放入37C水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化，并注意水面不可超过冷冻管盖沿，否则易发生污染情形。然后将其复苏培养，次日更换培养液。

Psi2 DAP(小鼠胚胎成纤维细胞)注意事项：

1)细胞漂浮：培养瓶不开封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。次日观察，如细胞大部分又贴回瓶底，表明细胞活力正常，剩余漂浮的细胞可以离心去掉，留10ml培养液培养观察，细胞生长至汇合度80%，进行消化传代；如细胞还是不贴壁，将细胞离心收集转到新培养瓶，原培养瓶加部分培养液继续培养，中间注意观察，我们的技术人员会一直跟踪指导，直到问题解决。

2)对于生长缓慢的贴壁细胞：可采用适当的提高培养基中血清浓度，或隔日换液的方法来保证细胞的状态和生长速度。

3)对于生长不均的贴壁细胞：在培养过程中若出现细胞分布明显不均时（即某一区域细胞已重叠生长，而旁边则为一块空白），此时可将细胞进行消化，重新打散，贴壁，加入新培养基进行培养。 

Psi2 DAP(小鼠胚胎成纤维细胞)下面介绍几种细胞培养过程中常见的污染：

一)杆菌污染：培养基中加入抗生素可以减少此种污染，但也不是绝对的。

二)支原体污染：传说中的黑焦虫，长得暴快。24小时就满视野都是了。污染源大多数情况下是培养用血清。

三)念珠菌污染：似乎无处不在，而且顽固得很。长得暴快(12h就能在细胞上面密布)。培养液澄清。低倍显微镜下像黑色的沙子铺在细胞上，高倍镜下呈树枝状或葡萄状。

四)霉菌污染、比较常见的一种污染，常常来源于污染的空气、水和器械。