9°N DNA 连接酶

产品及特点
9o N DNA连接酶能够催化磷酸二酯键的形成，使与同一互补靶 DNA 链杂交的两条相邻寡核苷酸链的 5' -磷酸末端和 3' -羟基末端通过磷酸二酯键相连。该酶在 45℃-90 ℃ 范围内均有活性。具体有下列特点：
9°N DNA 连接酶1. 可在高温条件下，连接 DNA 链上的切刻位点
2. 具有极高的耐热性，与 PCR 反应条件兼容
3. 可用连接酶检测反应和连接酶链式反应对等位基因进行特异性检测
4. 通过 PCR 扩增掺入磷酸化寡核苷酸进行诱变
9°N DNA 连接酶反应条件
1 X 9 oN DNA 连接酶反应缓冲液 [10 mM Tris-HCl，600 μM ATP，2.5 mMMgCl2，2.5 mM DTT， 0.1% Triton X -100 (pH 7.5 @ 25℃) ]。1X 9oN DNA连接酶反应缓冲液中，底物 DNA 和酶于 45℃ 温育 15 分钟，或者设定合适的反应条件使用热循环仪进行反应。连接反应通过加入含 50%甘油，50 mM EDTA 和溴酚蓝的混合物来终止。
单位定义(粘性末端活性单位)
1 单位指 50 ul 反应体系中，45℃ 条件下，15 分钟能使 50% 的 1 ug BstEII
消化的 λ DNA 片段（12 bp 粘性末端）发生连接所需要的酶量。粘性末端活性单位相当于切口封闭单位。
Buffer 成分
10 mM Tris-HCl，50 mM KCl，1 mM DTT，0.1 mM EDTA，200 μg/mlBSA，50% Glycerol，10 mM ammonium sulfate
9°N DNA 连接酶注意事项
9oN DNA 连接酶不能代替 T4 DNA 连接酶使用。该酶可以有效连接 12 bp 的互补片段，但却无法连接 4 bp 的互补片段（典型限制酶消化产物）。
参考文献
(1) Thermococcus sp. （strain 9°N-7）isolated by Dr. Holger Jannasch,
Woods Hole Oceanographic Institute, 1991.
(2) Barany, F. （1991） Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 88, 189–193.
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(4) Barany, F. （1991） The Ligase Chain Reaction in a PCR World （pp.
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90805-9（原90805-600） 即用型PCR试剂盒3.0 9ml
60906-50（限7折） cDNA第一链合成试剂盒（限7折） 50次
70701-50P 柱式病毒DNAout 50次
18-0790-100 多聚半乳糖醛酸酶(PG)测试盒 100管/48样
3090-250p 天净沙RNase清除剂A型(固相RNase清除剂) 250mL
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3090-250P 固相RNase清除剂 250mL
71206-50P 柱式动物DNAout 50次
3060-250 非冻型组织RNA保存液 250mL
3092-100P 溴化乙锭清除剂 100次
RNA系列
3060-100/250 非冻型组织RNA保存液 100 mL/250ml 390/790
111202-10/100 非冻型血液RNA保存液 10 mL/10ml 150/690
80601-100/250 非冻型细菌RNA保存液 100 mL/250ml 490/990
3070-100/250 动物RNAout（TRIzol） 100 mL/250ml 390/790
71201-250 柱式动物RNAout 250次 1990
71202-50 柱式血液RNAout 50次 890
101121-50 柱式软骨RNAout 50次 990
81102-30 石蜡包埋组织RNAout 30次 890
81220-50 柱式昆虫RNAout 50次 990
101113-50 柱式软体动物RNAout 50次 1290