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维生素B族常用种类介绍
维生素b1被称为精神性的维生素,这是因为维生素B1对神经组织和精神状态有良好的影响;维生素B1的缺乏容易引起各种脚气病。富含维生素B1的食物包括:酵母、米糠、全麦、燕麦、花生、猪肉、大多数种类的蔬菜、麦麸、牛奶。
维生素B2进入人体后磷酸化,转变成磷酸核黄素及黄素腺嘌呤二核苷酸,与蛋白质结合成为一种调节氧化-还原过程的脱氢酶。脱氢酶是维持组织细胞呼吸的重要物质。缺乏它,体内的物质的代谢紊乱,出现口角炎、皮炎、舌炎、脂溢性皮炎、结膜炎和角膜炎等。富含维生素B2的食物:牛奶、动物肝脏与肾脏、酿造酵母、奶酪、绿叶蔬菜、鱼、蛋类。
维生素B6是机体内许多重要酶系统的辅酶,参与氨基酸的脱羧作用、色氨酸的合成、含硫氨基酸的代谢和不饱和脂肪酸的代谢等生理过程,是动物正常发育、细菌和酵母繁殖所必需的营养成分。缺乏维生素B6容易引起:贫血症、脂溢性皮肤炎、舌炎。富含维生素B6的食物:啤酒酵母、小麦麸、麦芽、动物肝脏与肾脏、大豆、美国甜瓜(cantaloupe)、甘蓝菜、废糖蜜(从原料中提炼砂 糖时所乘的糖蜜)、糙米、蛋、燕麦、花生、胡桃。
维生素B12是由内脏中的细菌合成的,而且维生素B12存在于一切以动物为来源的食物中。维生素B12很难被人体吸收。胃所分泌的一种物质是吸收维生素B12的必要因素。对维生素B12的吸收来说,钙也是必要的元素。维生素B12对身体制造红血球和保持免疫系统的功能也是必要的。维生素B12也已经用于哮喘、疲劳、肝炎、失眠和癫痫等的治疗。维生素B12储存于肝脏中,但是很容易通过尿排除体外。维生素B12是很安全的,而且没有副作用。维生素B12缺乏者常是老人和酗酒者。富含维生素B12的食物:动物肝脏、牛肉、猪肉、蛋、牛奶、奶酪等
荧光法定量测定维生素B2的含量
一、实验题目:荧光法定量测定维生素B2的含量
二、实验目的:
1.掌握标准曲线法定量分析维生素B2的基本原理。
2.了解荧光分光光度计的基本原理、结构及性能,掌握其基本操作。
三、仪器与试剂:
1.仪器
荧光分光光度计;石英皿:1cm;容量瓶:50mL。
2.试剂
维生素B2标准溶液(10.0μg/mL):准确称取10.0000mg维生素B2置于100mL烧杯中,加1%乙酸溶液使其溶解,定量转移入1000mL容量瓶中,并用1%乙酸溶液稀释至刻度,摇匀,将溶液保存在冷暗处。1%乙酸溶液。
四、实验内容与步骤:
1.系列标准溶液的制备
取维生素B2标准溶液(10.0μg/mL)0.50mL、1.00mL、1.50mL、2.00mL、2.50mL分别置于50mL的容量瓶中,各加入蒸馏水稀释至刻度,摇匀。待测。
2.待测样品溶液的制备
取维生素B2样品液2.0mL于25mL容量瓶,加水稀至刻度,摇匀,待测。
3.激发光谱和荧光发射光谱的绘制
分别设置λem=522.0nm为发射波长,在200~500nm范围内扫描,记录荧光发射强度和激发波长的关系曲线,便得到激发光谱。从激发光谱图上可找出其最大激发波长为λex=371.0nm。
设置λex为371.0nm,在400~600nm范围内扫描,记录发射强度与发射波长间的函数关系,便得到荧光发射光谱。从荧光发射光谱上可找出其最大荧光发射波长λem和荧光强度,比较不同激发波长下获得的最大荧光发射波长λem和荧光强度。
4.标准溶液及样品的荧光测定
将激发波长固定在371.0nm,荧光发射波长为522.0nm,测量上述系列标准维生素B2溶液的荧光发射强度。以溶液的荧光发射强度为纵坐标,标准溶液浓度为横坐标,制作标准曲线。
在同样条件下测定未知溶液的荧光强度,并由标准曲线确定未知试样中维生素B2浓度,计算药片中维生素B2的含量。
五、数据记录与结果分析
1.激发光谱和荧光发射光谱绘制过程中实验数据记录如下:
激发波长λex/nm | 371.0 |
最大荧光发射波长λex/nm | 522.0 |
荧光强度 | 156.1 |
2.标准溶液及待测溶液的浓度和荧光强度记录如下:
维生素溶液浓度/(μg/mL) | 0.1 | 0.2 | 0.3 | 0.4 | 0.5 | 待测溶液 |
相对荧光强度 | 34.75 | 68.24 | 99.37 | 130.3 | 156.3 | 101.4 |
在λem=522.0nm为发射波长,200~500nm范围内扫描,得知最大激发波长为371.0nm,设置λex为371.0nm,在400~600nm范围内扫描,最大荧光发射波长为λem为522.0nm,荧光强度为156.1,将λem固定在522.0nm,λex固定为371.0nm,系列标准维生素B2的荧光发射强度制得的标准曲线相关系数为0.99905,线性关系良好标准曲线方程为:
可求得被测液的浓度为:
即原溶液浓度为:
Y= 6.244+ 305.16*X
R=0.99905
标准工作曲线的方程为Y= 6.244+ 305.16*X,相关系数为0.99905,线性关系较好。根据上述数据可得待测溶液浓度为0.31μg/mL。
维生素B12的定性定量检测
一、实验目的和要求
1. 掌握紫外可见分光光度计的结构及基本操作;
2. 掌握吸收曲线的绘制;
3. 掌握利用分光光度法进行定性鉴别及定量检测的方法。
二、实验原理
维生素B12的水溶液在278土1nm、3611土1nm、550土1nm三个波长处有较强吸收峰,壁纸根据其吸收光谱的形装和吸收峰的吸光度比值,可对维生素B12进行定性鉴别;采用吸光系数法,测量其在最大吸收波长的吸光度值,可计算样品中维生素B12的含量。
三、实验步骤
1、溶液配制
用加样器移取维生素B12注射液500μl,转移至10ml容量瓶中,用蒸馏水稀释至刻度,摇匀。
2、吸光度、透射比及吸收曲线的绘制
用1cm比色皿,以蒸馏水作为参比溶液,测定所配置的维生素B12溶液在下列各个波长处的吸光度、透射比;在坐标纸上以测定的吸光度为纵坐标,波长为横坐标制图,绘制吸收曲线,并根据吸收曲线确定定性、定量分析。
波长 | 359nm | 360nm | 361nm | 362nm | 363nm |
吸光度 | 0.461 | 0.467 | 0.466 | 0.457 | 0.447 |
透射比 | 34.5 | 34.0 | 34.2 | 34.8 | 35.7 |
波长 | 548nm | 549nm | 550nm | 551nm | 552nm |
吸光度 | 0,134 | 0.135 | 0,136 | 0.134 | 0.133 |
透射比 | 73.3 | 73.3 | 73.2 | 73.4 | 73.6 |
四、实验数据处理
1、定性鉴别
根据中国药典规定,维生素B12的水溶液在3611土1nm、550土1nm波长的吸光的比值在3.15~3.45之间,表明样品为维生素B12,即为合格药品。
2、定量检测
根据浓度25μg/ml维生素B12的注射液在3611土1nm、550土1nm波长的吸光的比值,按照下列计算的维生素B12注射液含量,结果在90.0~110.0之间,表明维生素B12注射液含量合格;其中207维生素B12为在波长的吸收系数,20为稀释因子。
五、实验体会
1. 实验得到的数据偏小,可能是实验过程中存在着误差。误差可能存在于读数、维生素B12溶液移取过程、比色皿上有污渍水迹及其润洗、分光光度计的操作中。而多次重复,在同一波长所得吸光度值也不一样,与波长的调节有关。
2.在实验中,第一次检测波长在548nm~552nm之间的吸光度值变化微小,数据不理想,当把调到380nm~1000nm后,第二次试验结果明显比第一好。在实验过程中,我们除了把实验操作规范化和熟练实验步骤外,还应细心观察,对我们所用的仪器要有相当的认知。
3.使用分光光度计之前,需要预热30分钟左右,而未放入比色皿时,必须将样品室仓盖打开,以免影响分光光度计的使用期限和灵敏度。