光谱带宽的重要性(对分析测试误差的影响)

　　如前所述, 影响紫外可见分光光度计定量分析误差的因素很多, 如杂散光、噪声、基线平直度等。同样, 光谱带宽是影响紫外可见分光光度计定量分析误差的主要因素之一。并且, 目前国际上许多紫外可见分光光度计使用者对此未引起重视。我国的广大科技工作者, 对这个很重要的问题更是不大注意。

　　首先, 我们来看一下T. Owen 的观点: T. Owen 在研究光谱带宽对分析误差的影响后, 他指出紫外可见分光光度计的光谱带宽非常重要。紫外可见分光光度计的光谱带宽( SBW)/ 自然带宽(NBW) ≤0. 1 时( 自然带宽即试样吸收带的半高度的宽度) , 该仪器可满足99%的试样的分析, 并且分析准确度可达99. 5%。但是, 目前国内外广大分析工作者还远没有认识到光谱带宽是紫外可见分光光度计分析误差的主要来源这个非常重要的问题。

　　光谱带宽的测试方法

　　目前, 国际上对光谱带宽的测试方法一般是采用“ 谱线轮廓法”。主要是选用某些光源的特征谱线, 对它进行光谱扫描, 绘出该谱线的轮廓, 再测出该谱线的半峰高的宽度即为光谱带宽。用于光谱带宽的测试的光源一般为线光谱光源。并且, 要求它在离被测的谱线附近20nm 的范围内, 最好没有其他谱线。一般紫外可见分光光度计的制造者在测试仪器的光谱带宽时, 多选用Hg 灯; 因为它的546. 1nm、253. 7 nm等特征线在其前后20nm 以内, 都没有其他谱线, 是紫外可见分光光度计光谱带宽测试最好的光源。也有人选空心阴极灯作测试光源, 但为数较少。还有很多人在测试紫外可见分光光度计的光谱带宽时, 采用氘灯的656. 1nm 或486. 0nm 这两根特征谱线。特别是656. 1nm 这根线, 常被绝大多数科技工作者使用。具体做法是: 将仪器在660 ～470nm 范围内扫描, 求出656. 1nm 这根特征谱线的半宽度即是光谱带宽。

　　结论

　　SBW 是非常重要的技术指标, 它直接影响分析测试的误差。虽说绝大部分样品的紫外可见吸收光谱的吸收峰不大尖锐, 2nm 的光谱带宽完全可满足分析测试要求, 但有少部分样品, 如青霉素钠、青霉素钾等的吸收峰很尖锐,不能用2nm 的光谱带宽测试, 否则, 一些小的尖锐峰会消失, 而大的尖锐峰的测量值会偏低, 使分析测量误差增大。因此, 一定要特别重视SBW 对分析测试误差的影响。只有这样, 才能提高分析测试结果的可靠性、才能更快提高我国分析测试技术的水平。