MERCK Fractogel 触角型生物色谱填料

MERCK Fractogel 触角型生物色谱填料
德国默克公司在1989年推出了MERCK Fractogel 触角型生物色谱填料，该介质具有良好的机械稳定性，在应用上结合了高载量、高蛋白回收率、低稀释体积的特点，为生物工程下游纯化工作提供了有力的工具。使用该介质可以在高流速条件下保持高载量和高分辨率，即便是粗提物直接上样。和传统的以糖为基质的介质相比，同样的层析柱使用Fractogel® EMD介质可以将分离速度提高5倍。

MERCK Fractogel 触角型生物色谱填料简介

基质

Fractogel EMD的结构和其它亲水性的树脂如葡聚糖,琼脂糖,纤维素来讲是完全不同的. Fractogel EMD是合成的聚合物树脂, 具有优越的耐压性能. 孔径为800Å, 能保证生物大分子的自由出入, 聚合物中的大量醚键能够保证该树脂有足够的亲水性. 其粒径有20~40μm, 和40~90μm两种. 其中分子筛介质的粒径为20~40μm.

“触角”

Fractogel EMD的官能团通过共价键合结合到Fractogel聚合物骨架的羟基上, 这些官能团称为“触角”. 因官能团共价键合到骨架的羟基上, 所以聚合物基质和基质表面的官能团对于清洗和再生的处理都是非常稳定的。“触角化学结构”的最大优越在于这种介质具有比传统介质更多的有效官能团数量，生物大分子可以更加有效地与介质的官能团结合；另一方面，官能团的“触角型”空间结构降低了生物分子和介质基质之间的非特异性相互作用，从而提高了目标生物分子的回收率。

根据不同的机理和应用，Merck推出了一系列“触角型”介质. 包括离子交换介质, 亲和层析介质, 分子筛Fractogel EMD BioSEC, 疏水层析介质。

下图以阴离子交换介质为例,讲述了“触角型”介质和传统介质的区别

从上面的对照可以看出，使用“触角型”介质可以获得更好的分辨率和更高的样品通量。

从上图可以看出，使用“触角型”介质可以获得更低的稀体积，减少了产物浓缩的处理工作。

MERCK Fractogel 触角型生物色谱填料特点：

· 纯化收率高: 载量大, 高流速,高盐浓度条件下有比传统介质更好的生物分子结合能力.

· 产品安全: 与糖基质的介质相比, Fractogel EMD不会受微生物分解, 使受内毒素污染的风险大大降低.

· 非常经济

· 化学稳定性好,介质寿命长.

MERCK Fractogel 触角型生物色谱填料应用：

1. 快速蛋白纯化:

天然或重组血浆因子使用触角型离子交换介质纯化可以获得非常高的样品流量; 多肽以及低分子量的蛋白样品如NADP, ATP和Gangliosides(神经节苷酯)也可用Fractogel离子交换介质进行高效纯化; 对于带Histidine Tag的蛋白, Fractogel EMD Chelate则是一种有效的分离工具.

2. 高效蛋白”精纯”:

使用Fractogel EMD BioSEC进行分子筛色谱可以有效地作为IgG, IgM,重组蛋白,血浆因子以及其它生物分子纯化工艺的精纯步骤.

3. 高产率进行抗体纯化:

就抗体纯化而言, 样品可直接上到Fractogel EMD SO3-层析柱或Fractogel EMD SE Hicap层析柱上, 样品中的血清白蛋白,核酸以及酚红不会和介质结合, 从而省去预处理步骤. Fractogel EMD TA是专门为抗体纯化开发的亲硫吸附亲和层析介质.

4. 有效去除DNA:

制备质粒DNA可选用Fractogel EMD阴离子交换介质

5. 提高病毒的分离效果:

Fractogel EMD TMAE和DEAE可将病毒的滴度降低5~6个数量级.

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