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1. 具有出色的抗体特异性结合能力
图1 BeaverBeads™ SLP磁珠技术原理示意图。图中左侧平台上排布了杂乱无章的Protein A及其结合的单克隆抗体,这是传统共价交联法包被的磁珠表面;图中右侧是采用SLP专利技术包被的磁珠表面与单克隆抗体结合的示意图。
如图1所示,SLP蛋白自组装的特性以单分子层结晶的方式把与之融合的Protein A定向固定在磁珠表面,其蛋白表面吸附率可达100%,也因此大大提高了Protein A特异性结合单克隆抗体的效率。
图2 BeaverBeads™ SLP磁珠与进口知名品牌磁珠的单克隆抗体结合效率对比图。
如图2所示,每毫克SLP-Protein A磁珠的单克隆抗体(IgG)结合能力可达254μg,每毫克SLP-Protein A/G 磁珠的单克隆抗体(IgG)结合能力高达357μg,是三个进口知名品牌的数倍。
图3 BeaverBeads™ SLP-Protein A 磁珠超低非特异性吸附实验蛋白质SDS-PAGE电泳示意图。
如图3所示,使用0.5mg SLP-Protein A磁珠从250μL 10倍稀释的人血清中提取抗体(IgG),与直接使用人类单克隆抗体(Human IgG)为底物的对照组相比,直接从血清中提取的IgG纯度与对照组基本一致甚至更高,证明SLP-Protein A磁珠具有超低非特异性吸附的性能。
2. 操作省时、简便、温和
图4 BeaverBeads™ SLP磁珠应用流程示意图
BeaverBeads™ SLP系列产品采用直径200nm的具有超顺磁性特征的磁珠作为固相基质,比传统琼脂糖基质操作更简便,无需离心,只需简单的磁性分离步骤即可实现快速分离,这样不仅可以避免反复吸液造成填料损失而带来的误差,而且能够避免离心操作中机械剪切力对活性蛋白的损伤。
图5 BeaverBeads™ SLP磁珠与单克隆抗体(IgG)结合效率曲线
如图5所示,与传统的微孔板相比,BeaverBeads™ SLP系列磁珠与IgG的反应更迅速,10分钟即可完成抗体吸附过程。
图6 BeaverBeads™ SLP磁珠与传统“层析仪-琼脂糖凝胶纯化系统”抗体纯化所需时间对比示意图
以上测试结果及统计数据表明,海狸SLP磁珠产品系列不仅结合目标蛋白更加迅速,而且操作更简单、耗时更短,最大程度上为研究者提高了效率,提供了便利。
3. 产品性能高
图7 存放时间对SLP磁珠的抗体结合效率影响测试结果示意图
如图7所示,将SLP-Protein A磁珠置于37℃环境下连续测试8周,结果表明,SLP-Protein A磁珠存放稳定性良好,抗体结合效率无明显衰减。
4. 可使用pH值高达4.5的洗脱缓冲液,大大降低酸性敏感的抗体在低pH值洗脱环境下受到损伤的风险
5. 极低的Protein A配基脱落率
Protein A 对人体来讲是一种细菌外源蛋白,较高浓度的Protein A会引起机体的免疫反应,美国FDA规定临床治疗用单抗药物中Protein A配基的含量不得超过20ppm。抗体纯化介质表面交联的Protein A在抗体纯化过程中的脱落是抗体药物中存在Protein A的主要原因。 BeaverBeads™抗体纯化磁珠具有极低的Protein A配基脱落率,与目前获得美国FDA认证的抗体纯化填料相比没有明显差别。
图8 抗体纯化材料表面Protein A在抗体纯化溶液中残留量检测示意图
如图8所示, BeaverBeads™ SLP磁珠与GE MabSelect Protein A填料的抗体纯化产品中Protein A残留量均低于美国FDA的标准(20ppm)。
6. 可重复使用
图9 海狸SLP磁珠纯化效率重复性测试结果示意图
如图9所示, BeaverBeads™ SLP磁珠经过15次不间断的抗体纯化操作后,仍能保持 75% 的IgG结合能力,经过再生处理后,其抗体结合能力仍然能够恢复到最初的90%。
- 询价产品:SLP-Protein A/G 抗体纯化磁珠(1mL) (1mL)
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