）放免试剂盒 100T

生长激素释放激素放免药盒说明书

GHRH（FK118） RIA KIT
生长激素释放激素（GHRH ）放免试剂盒，GHRH RIA KIT

生长激素释放激素（GHRH）由下丘脑弓状核神经元合成并释放入垂体门脉系统后，与垂体生长激素细胞表面的生长激素释放激素受体（GHRHR）结合后,活化非选择性离子通道,使细胞膜去极化,促进钙离子内流和GH分泌. 本药盒利用人血清中样品GHRH与其示踪物¹²⁵I-GHRH与特异性GHRH抗体竞争结合反应，形成¹²⁵I-GHRH-GHRHAb; GHRH-GHRHAb复合物，加入（IgG）分离剂。利用分离剂分离出复合物，并测定复合物中的放射性计数。通过数据处理求出样品中GHRH的浓度。本药盒为定性测定，用血量少，直接加样，操作简便，快速。

试剂盒组成与配制：

1、GHRH标准品5瓶，其浓度分别为10.00、20.00、40.00、80.00、160.00ng/ml。

2、¹²⁵I-GHRH 1 瓶。

3、GHRH抗体 1 瓶。

4、缓冲液一瓶。

5、分离剂（第二抗体）一瓶。

样本收集和提取：

1、静脉血3ml，注入含0.5M EDTA-Na230ul的试管中，混匀，离心，取血浆测定。

如贮于－20℃2-3月内测定不影响结果。

2、组织的提取：取大小适宜的组织块，立即称重后于煮沸的生理盐水（1ml）中煮

沸3分钟，再加1Ｎ冰醋酸0.5ml 于匀浆器中匀浆提取,再用1ＮNaOH 0.5ml中

和，离心3000转/分，30分钟（好是低温离心）。取上清液贮存于－20℃以下

待测样本可保留2-3个月。

测定操作步骤：

GHRH RIA 操作程序加样单位:ul

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试剂 T NSB B₀ S₁-S₈ 标本

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缓冲液 —— 200 —— —— ——

零标准 —— —— 100 —— ——

标准液 —— —— —— 100 ——

标本 —— —— —— —— 100

抗体 —— —— 100 100 100

¹²⁵I-GHRH 100 100 100 100 100

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混匀，4℃ 放置24小时

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分离剂 500 500 500 500 500

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混匀，室温放置15分钟，3500转/分离心15分钟。弃上清，测沉淀计数（cpm）。

结果计算：

以N/T、B/T计算NSB、S₀结合百分率，以B/B₀计算标准及待测物结合百分率，

在半对数座标纸上绘制标准曲线，并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果。

注意事项：

1、本月标准品每瓶用 ml缓冲液稀释

2、本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释

3、本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释

药盒的技术指标：

1、灵敏度:≤ 3Pg/ml。

2、重复性:批内cv< 8％,批间cv<12％。

3、回收率:平均回收率 88％。

4、正常参考值：36.33±12.1 ng/ml

本月药盒参考数据：

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T NSB S₀ S₁ S₂ S₃ S₄ S₅

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CPM

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N/T% 2.0 B₀/T% 47 B/ B₀ % 92 84 67 43 22

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