Sephadex LH-20葡聚糖凝胶

Sephadex LH-20葡聚糖凝胶

——最适合天然产物的纯化,特别是嗜脂性分子纯化及制备

Sephadex 葡聚糖凝胶是通过表氯醇交联多个葡聚糖得到。

葡聚糖是以蔗糖为底物的细菌Leuconsostocmesenteroides的代谢产物，为线性高度聚合碳水化合物的总称。由于每个葡聚糖单元含有三个羟基，因此葡聚糖易溶于水。要使葡聚糖不溶于水，而成为可以在水中溶涨的凝胶，就必须与双官能团的表氯醇交联。表氯醇的比例越大，交联成分越高，胶的溶涨能力就越小，排阻极限就越低，这时的产品为G-10、G-25等。

我们知道G-10、G-25这些葡聚糖凝胶是在水溶液中使用，若要用有机溶剂作为流动相，只有通过羟丙基化将Sephadex G转化为可在有机溶剂中溶涨的葡聚糖凝胶。这时的产品为Sephardex LH-20葡聚糖凝胶.或Sephardex LH-60葡聚糖凝胶。

Sephadex LH-20葡聚糖凝胶层析原理:

凝胶过滤--------依赖于分子的大小和形状
吸附层析-----依赖于被分离化合物与凝胶之间的氢键数量和质量
分配层析----------------依赖于被分离化合物在流动相（溶剂）和固定相（凝胶）之间的分配，这主要由样品的极性和溶剂的极性决定的。

Sephadex LH-20葡聚糖凝胶特点:

适合用有机溶剂分离嗜脂性分子，可以非常经济地大规模制备各种天然产物
结合凝胶过滤、分配色谱及吸附性层析于一身，分离结构非常相近的分子
载量可高达300mg样品/ml凝胶，极少需要再生，分离效果可保持十几年不变

Sephadex LH-20葡聚糖凝胶性质

Sephadex LH-20性质和操作		干胶溶胀表
排阻极限	4-5KD(球蛋白)	溶剂	溶胀体积(ml凝胶/g干胶粉末)
上样量	取决于所需分辩率	Dimethyl sulphoxide 二甲亚砜	4.4-4.6
尺寸排阻模式	小于总体积的20%	Pyridine 嘧啶	4.2-4.4
正相分配模式	小于总体积的1%	Water 水	4.0-4.4
胶粒形状	球形,多孔	Dimethylformamide 二甲基甲酰胺	3.8-4.2
颗粒大小(干)	18-111μm(直径)	Saline 生理盐水	3.9-4.1
颗粒大小中间值(干)	70μm(直径)	Methanol 甲醇	3.8-4.1
颗粒大小(甲醇)	27-163μm(直径)	Methane dichloride 二氯乙烷	3.8-4.1
颗粒大小中间值(甲醇)	103μm(直径)	Chloroform 氯仿	3.8-4.1
最大线性流速	720cm/h	Proanol 丙醇	3.7-4.0
参考线性流速	60cm/h	Ethanol 乙醇	3.6-3.9
pH的稳定性		Isobutanol异丁醇	3.6-3.9
操作过程	2-11	Formamide 甲酰胺	3.6-3.9
清洗过程	2-13	Methylene dichloride 二氯甲烷	3.6-3.9
化学稳定性	在许多水溶液中都稳定	Butanol 丁醇	3.5-3.8
	有机溶剂系统中都稳定.	Isopropanol异丙醇	3.3-3.6
	高压灭菌	Tetrahydrofuran 四氢呋喃	3.3-3.6
高压灭菌	121 ℃, 20min	Dioxane 二氧杂环己烷	3.2-3.5
操作温度	4℃-40℃	Acetone丙酮	2.4-2.6
保存条件		Acetonitrile乙腈	2.2-2.4
新填料	4-25℃	Carbon tetrachloride 四氯化碳	1.8-2.2
使用后填料	4-8℃, pH6-8, 勿冷冻,	Benzene 苯	1.6-2.0
	加入抑菌剂(如20%乙醇,0.04%叠氮钠)	Ethyl acetate乙酸乙酯	1.6-1.8
		Toluene甲苯	1.5-1.6

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