电脑紫外检测仪
使用说明书
HD-5电脑紫外检测仪是应用于液相色谱中具有紫外吸收物质(蛋白、核酸、多肽、酶)的检出仪器。该仪器与层析柱、横流泵、部分收集器及电脑或记录仪配套,可组成一个完整的液相色谱分离分析装置。在柱层析分离过程中,洗脱液流过该仪器样品池,电脑或记录仪即可自动绘制出样品分离的图谱(吸受峰或透过峰),同时可检测出所需样品在部分收集器试管中的分布情况,并随时监测柱岑溪过程,特别是在摸索实验过程中,及时改变洗脱条件,以便迅速取得最佳实验方案。
主要技术指标:
1.检测波长:220nm,254nm,280nm,340nm
2.流动式样品池:容积100μl
3.最大流量:10ml/min(特殊要求留、另配)
4.配接记录仪信号:0-10mV
5.COM接口,电脑自动绘制样品分离图谱,数据分析、计算、保存、可打印实验结果
6.使用环境温度:0-30℃
7.工作时间:连续
8.电源:220AC 20W
9.保险丝:BGXP-1 1A
使用方法:
一、校对仪器工作状态
1.选定检测波长:从有机玻璃盒中取出干涉滤光片(250nm或280nm),插入仪器正面“滤光片”下方小长方孔内,并使其插入到底部位置(插入时应注意使干涉滤光片侧面有一直径为3mm的半球形凹槽朝上)。
2.按下“电源开关”(在仪器后背板上),仪器预热20分钟,以便得到较好的稳定性。
3.校对T%~A
a).按下按键开关“T”键,“透过率T”指示灯亮。调节“调T”旋钮(顺时针调节透过率增大),使数字显示100,此时透过率T为100%。
b).按下按键开关“1A”键,“吸光度A”指示灯亮,调节“A调零”旋钮,使数字显示000,此时吸光度A为零。
二、配接记录仪检测绘制样品分离图谱
1.连接检测仪和记录仪:连接线有金属插头的一端接在检测仪后背板“接记录仪”插口上,(次插口输出信号可同时输出给部分收集器作为控制信号)另一端“黑”“红”两个接线叉分别接在记录仪“L”“H”两个输入插座上。
2.选择系统最佳工作状态。
a).校对记录仪零位
b).记录仪“记录纸速度”选择2cm/h档
c).记录仪输入“量程”选择10mv档
d).横流泵流速视层析柱大小选择1~10ml/min
3.确定基线:调节“调T”旋钮,确定基线位置。为防止系统出现负漂移,基线通常调节在大于零的位置上,如记录仪满量程的十分之一。读取A值时注意扣除次数值。
4.确定好基线位置后,即可上样(特别注意上样后切勿再改变基线位置)。当洗脱样品流过检测仪时,记录仪即可绘制出样品吸光度A随时间h变化的图谱。
5.按键开关2A至0.05A每一档均表示记录仪满量程读数。
如按下“2A”档,记录仪记录笔指在满量程位置,此时吸光度为2A,记录笔指在满量程50%的位置,吸光度即为1A;如按下“0.5A”档,记录仪记录笔指在满量程位置,此时吸光度为0.5A,记录笔指在满量程50%的位置,吸光度即为0.25A;
选取吸光度量程视样品浓度而定,通常选取“1A”档,次档既便于读数,也能满足一般实验需求。
三、直接与电脑连接检测、绘制、打印、保存样品分离图谱及计算有关数据
1.将仪器后背板“接电脑”插口于电脑COM1串行口用随机配置的连接线相接。
2.按使用方法“一、”校对仪器工作状态。
3.将吸光度量程2A~0.05A置任意档(勿置于T档)。
4.层析系统准备就绪后开启电脑,插入光盘,待自动出现“核酸蛋白检测系统”界面后,按以下步骤操作:选择“直接运行或本机安装”/检测操作/采集COM1/保存(默认文件名为当前日期)/洗脱图谱选择/吸光度(默认状态为1A)/记录速度(默认状态为10个小时)。
5.用键盘“Home(放大)”和“End(缩小)”键调节洗脱谱图在电脑屏幕上的大小。
6.确定基线:调节“调T”旋钮,确定基线位置。为防止系统出现负漂移,基线通常调节在大于零的位置上,如满量程的十分之一。读取A值时注意扣除次数值。
7.确定好基线位置后,即可上样(特别注意上样后切勿再改变基线位置)。当洗脱样品流过检测仪时,电脑即可绘制出样品吸光度A随时间h变化的图谱。
8.实验结束:点击检测操作/停止COM1采集/确定。
9.工具栏功能说明:
a).单击工具栏中“ ”按钮,所绘谱图全貌不论时间长短将全部显示在屏幕上。
b).单击工具栏中“ ”“ ”按钮一次,屏幕显示谱图横坐标相应展宽或压缩十分之一。
c).单击工具栏中“ ”“ ”“ ”“ ”按钮,所绘谱图可相应向左移动十分之一帧,向左移动一帧,向右移动十分之一帧,向右移动一帧。
d).点击工具栏“ ”,按钮按住鼠标左键,用方框选取需要计算面积的谱图,松开左键可显示该谱图的面积。该面积是在坐标系统默认状态下(吸光度为1A,记录速度为10小时)计算出来的一个无量纲的量。坐标系统改变(即峰形大小改变),其数值不变,此项功能对同一类型样品提取的得率情况进行比较尤为方便。
e).单击工具栏“ ”按钮,可计算所选收集峰的相关数据。方法如下:
用纵向两根棕色线确定收集范围:
点击左边一根棕色线,移至收集起始点,点击;
点击右边一根棕色线,移至收集结束点,点击。
用纵向两根绿色线确定收集峰峰宽:
点击左边一根绿色线,移至收集峰起始点,点击;
点击右边一根绿色线,移至收集峰结束点,点击。
用横坐标上一根紫色线确定收集峰的基线:
点击紫色线,移至收集峰基线,点击。
完成上述选择后,界面右上方将显示收集峰的相关数据。
1.双击谱图上任意点,可显示该点A值或T%值。
2.在菜单“设置”中,可选择实验日期是否打印。
3.在菜单“窗口”中,可选择两个层析谱图的排列方式。
四、注意事项
1.对电脑硬件的基本要求
a).电脑在简体中文Win98.Win2000.WinXP下运行。
b).显示器分辨率为800*600或1024*768,小字体,256色配置。
c).电脑系统必须正常工作,保证COM1串行口有效。
2.在电脑断电情况下连接系统接线。
3.上述“点击”,均指单击鼠标左键。
4.实验过程中需要切换或选择适当的洗脱谱图和吸光度,应在电脑菜单中直接操作(不可改变仪器工作状态)。
5.加样钱校对仪器工作状态,并确定好基线位置,加样后不可再调节仪器所以旋钮。
6.实验结束后在样品池进口(下端为进口、上端为出口)串入横流泵,用蒸馏水清洗10分钟以上,以免样品粘在样品池上而影响仪器检测灵敏度。
7.实验结束后取出干涉滤光片置于有机玻璃盒中,并保持盒中干燥,切勿接触有害气体。禁止用水货有机溶剂擦拭光片表面。
8.仪器应避免在强光下工作。
9.在仪器通电情况下不得取出样品池,以免仪器内光电器件受损。
10.环境温度过低,仪器背后“光源”灯不亮时,按光源“辅助启动”即可。