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货号 | 产品名称 | 规格 | 价格(元) | 说明书下载 |
HZ106-01 | 无内毒素高纯质粒中量提取试剂盒(离心柱型) | 10次 |
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无内毒素高纯质粒中量提取试剂盒(离心柱型)产品介绍
本试剂盒采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞,粗提物通过独特的过滤柱选择性结合离心除去内毒素,然后离心吸附柱内的硅基质膜在高盐、低pH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA,再通过去蛋白液和漂洗液将杂质和其它细菌成分去除,最后低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从硅基质膜上洗脱。
无内毒素高纯质粒中量提取试剂盒(离心柱型)产品特点
1. 不需要使用有毒的苯酚,氯仿等试剂,也不需要乙醇沉淀。快速,方便,从50ml大肠杆菌LB(Luria-Bertani)培养液中,可快速提取0.2~
0.4mg纯净的高拷贝质粒DNA,提取率达80~90﹪。
2. 获得的质粒产量高,超螺旋比例高,纯度好,可直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序、转染等各种分子生物学实验。
产品储存
本产品收到后按照说明书指示温度存放各成份,储存18个月不影响使用效果。
无内毒素高纯质粒中量提取试剂盒(离心柱型)自备试剂
无水乙醇
注意事项
1. 提取的质粒量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。如果所提质粒为低拷贝质粒或大于10kb的大质粒,应加大菌体使用量,同时按比例
增加P1、P2、P3的用量,洗脱缓冲液应在70℃预热。可以适当的延长吸附和洗脱的时间,以增加提取效率。
无内毒素高纯质粒中量提取试剂盒(离心柱型) 2. 得到的质粒DNA可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。OD260值为1相当于大约50μg/ml DNA。电泳可能为单一条带,也可
能为2条或者多条DNA条带,这主要是不同程度的超螺旋构象质粒泳动位置不一造成,与提取物培养时间长短、提取时操作剧烈程度等有关。
本公司产品正常操作情况下基本超螺旋可以超过90%。
3. 质粒DNA确切分子大小,必须酶切线性化后,对比DNA分子量Marker才可以知道。处于环状或者超螺旋状态的的质粒,泳动位置不确定,无法
通过电泳知道其确切大小。
4. 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA,不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱,但应该确保pH大于7.5,pH过低影响洗脱效率。用水洗
脱,质粒应该保存在-20℃。质粒DNA如果需要长期保存,可以用TE缓冲液洗脱(10mM Tris-HCl,1mM EDTA,pH 8.0),但是EDTA可能影响
下游酶切反应,使用时可以适当稀释。
- 询价产品:无内毒素高纯质粒中量提取试剂盒(离心柱型) GeneMark
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