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收到人骨骼肌成肌细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
人骨骼肌成肌细胞骨骼肌细胞是人体内最大的细胞之一。它们是成肌细胞融合形成的多核细胞。骨骼肌再生是有许多因素参与的复杂过程。当骨骼肌受损时,静止的、被称为卫星细胞的成肌细胞被激活增殖、迁移、最终分化。多种的细胞信号途径,包括磷脂酰肌醇(-3)激酶、钙神经素、JAK2/STAT3和有丝分裂原活化蛋白激酶,参与骨骼肌的生长。在体外培养的人类骨骼肌细胞中进行的骨骼肌分化实验发现胰岛素刺激的葡萄糖转运是葡萄糖转运蛋白4介导的,硫酸乙酰肝素蛋白聚糖也与此过程有关。单核细胞融合形成多核肌管是骨骼肌发育的中心事件。该过程的发生和进展中,成肌细胞控制着一系列复杂的交互活动。骨骼肌细胞的培养是研究细胞分化中该过程的重要模型。
人骨骼肌细胞(HSkMC)提取于人肩带骨骨骼肌组织,原代冻存。每管含有细胞数>5×105cells/ml,此细胞通过对myosin, actin和actinin免疫荧光染色验证,经测试不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。细胞可以达到15倍增。
推荐培养基:(SkMCM, Cat. No. 3501)
Reference
[1]. Olwin BB, Hauschka SD. (1986) Identification of the fibroblast growth factor receptor of Swiss 3T3 cells and mouse skeletal muscle myoblasts. Biochemistry 25(12):3487-92.
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[3]. Kou Kou, Rotwein PS (1993) Transcriptional activation of the insulin-like growth factor-II gene during myoblast differentiation. Mol Endocrinol 7:291-302.
人骨骼肌成肌细胞传代方法:
收到细胞后,取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。
(一)如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液,仅留下10ml培养液在瓶内继续培养。
(二)如果细胞已长满,即可进行传代培养。具体步骤如下:
1. 弃去培养液,用PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,人骨骼肌成肌细胞倒转放于37度培养箱1-3分钟预热,然后又将培养瓶倒转大约30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆分散,轻敲几下培养培养瓶,细胞随即脱落下来。
3. 加入6-8ml完全培养基,吸出,分到新的培养瓶中。1:3~1:6传代;2~3天1次。
。
注意:传代后一半用我们的培养基,一半用你们的,以免细胞不适应而造
成生长不好。
冻存方法: 冻存液:基础培养基+5%DMSO+20%FBS
储存:液氮储存
人骨骼肌成肌细胞其它细胞系展示表:yb-hxbz-448 人黑色素瘤细胞 B16 规格25毫升/株.
yb-hxbz-449 人黑色素瘤细胞 SK23 规格25毫升/株.
yb-hxbz-450 人黑色素瘤细胞 SK37 规格25毫升/株.
yb-hxbz-451 人黑色素瘤细胞 A875 规格25毫升/株.
yb-hxbz-452 人皮肤黑色素瘤细胞 SK-MEL-1 规格25毫升/株.
yb-hxbz-453 人恶性黑色素瘤细胞 A375 规格25毫升/株.
yb-hxbz-454 人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞 M619 规格25毫升/株.
yb-hxbz-455 人黑色素瘤细胞 M14 规格25毫升/株.
yb-hxbz-456 人葡萄膜黑色素细胞 UM 规格25毫升/株.
yb-hxbz-457 人视网膜色素上皮细胞 D407 规格25毫升/株.
yb-hxbz-458 人视网膜母细胞瘤 Rb 规格25毫升/株.
yb-hxbz-459 人眼脉络黑色素瘤细胞 OCM-1 规格25毫升/株.
yb-hxbz-460 人眼脉络黑色素瘤细胞 MuM-2C 规格25毫升/株.
yb-hxbz-461 人眼脉络黑色素瘤细胞 MuM-2B 规格25毫升/株.
yb-hxbz-462 人低侵袭性脉络膜黑色素素瘤细胞 OCM-1A 规格25毫升/株.
yb-hxbz-463 人视网膜母细胞瘤 Y79 规格25毫升/株.
yb-hxbz-464 荧光素酶转染人成骨肉瘤细胞 U2OS-Luc teT-on 规格25毫升/株.
yb-hxbz-465 人横纹肌肉瘤细胞 TE671 subline No.2 规格25毫升/株.
yb-hxbz-466 人眼脉络黑色素瘤细胞 C918 规格25毫升/株.
yb-hxbz-467 人横纹癌细胞 A673 规格25毫升/株.
yb-hxbz-468 人恶性胚胎横纹肌瘤细胞 RD 规格25毫升/株.
yb-hxbz-469 人表皮癌细胞 A-431 规格25毫升/株.
yb-hxbz-470 人正常皮肤细胞 HaCaT 规格25毫升/株.
yb-hxbz-471 人皮肤纤维微细胞系 Malmc 规格25毫升/株.
yb-hxbz-472 人皮肤成纤维细胞系 BJ 规格25毫升/株.
yb-hxbz-473 人成纤维肉瘤细胞 HT1080 规格25毫升/株.
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