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提供的小鼠椎间盘髓核细胞取自新鲜的组织,按照标准操作流程分离培养。研发的小鼠椎间盘髓核细胞完全培养基能提供细胞最佳的生长条件,降低杂细胞污染,保证不同批次间细胞质量的稳定。
同时,还建立了严格的细胞鉴定流程,所提供的原代细胞均需经过细胞类型特异性标记物、细胞形态学等检测,保证细胞纯度在90%以上;同时也需经过微生物检测,保证不含有HIV、HBV、HCV、支原体、真菌及其他类型的细菌。
购买细胞注意事项:
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养过夜,隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常,请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活力,请拍下照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件;建议直接购买提供的完全培养基。
5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和技术部沟通交流。
6. 该细胞只能用于科研,不得用于临床应用。
小鼠椎间盘髓核细胞细胞基本技术
冻存细胞的复苏
小鼠椎间盘髓核细胞应遵守慢冻快融的原则。先将水浴锅调至37-37.5度,取出冻存的细胞迅速放入后将细胞面浸至水面以下不断摇动至融化。
在无菌台内将完全培养基加入50ml的小培养瓶内,约5ml左右,然后用无菌吸管从冻存管内取出细胞,置培养并内轻轻摇晃,使细胞均匀后置培养箱内培养。
传代:
贴壁细胞:
对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱(或PBS洗1-3次)。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml,按此比例进行消化,(根据经验),晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟,镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后,轻轻振动瓶底使细胞全部脱落,加入2-3ml完全培养基后,轻轻吹打,使细胞基本成单个悬浮,然后分置其它无菌培养瓶内,加入完全培养基后继续培养或实验。
悬浮细胞:
一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内,加入完全培养基继续培养,如要高浓度可先离心1000rpm,5min后加入完全培养基,轻轻吹匀后,分置其它培养瓶内加入完全培养基继续培养。
冻存
将贴壁细胞消化后离心收集,悬浮细胞直接离心收集,以完全培养基或胎牛血清重悬细胞至终浓度约106/ml。加入10%的DMSO。以每管1~2ml分装至冻存管中。用绝热材料包裹置-70摄氏度冰箱冷冻过夜。次日保存到液氮中。
小鼠椎间盘髓核细胞
支原体污染及检测:
(1).支原体污染在细胞培养中最常见、不易被查觉,但支原体污染可显著影响细胞功能干扰实验结果。支原体是介于细菌和病毒之间的目前所知能独立生活的最小微生物,它无细胞壁,形态呈高度多形性,最小直径0.2um,可通过滤器。
1膀胱癌细胞
支原体在污染细胞后,它通过影响细胞的DNA、RNA 的合成及急速消耗培养基中的氨基酸来抑制细胞的生长,并能降低细胞的融合率。因此,在运用各种细胞系进行实验研究时,首先要证明所用细胞有无支原体的污染。
经过严格质控,不含有细菌、真菌、病毒(HIV、HBV、HCV)、支原体。
(2).支原体污染后,培养基可不发生浑浊,细胞病变轻微或不明显,因此难以发现。目前,支原体检测的方法有以下几种。
(a).相差显微镜观察;
(b).低张处理地衣红染色法;
(c).荧光染色法;
(d).酶标法;
(e).PCR法:基础医学细胞中心使用该方法进行检测。
优点:灵敏度高,检测耗时短,样品量小
(只需50ul细胞培养用液上清)。
缺点:引物及制剂费用较高。
★★★★★希望这些基本技术及资料可以帮到您★★★★★
小鼠椎间盘髓核细胞
特点:
1.传代情况:P2
2.活性好、稳定性高、适应性强,易培养
3.传代快、多:2-3天传一代,普通可传10代以上 肿瘤细胞无限制
4.纯度高达95% 无污染和其他杂细胞
5.有技术疑问可以提供一对一的解答:专业,及时,耐心
6.货期短,一般冻存管5-7个工作日,复苏7-15个工作日。
★我库细胞近3000种,来源于美国ATCC.
种属来源:小鼠、大鼠、人、猴、牛
组织来源: 各组织癌细胞、表皮细胞、上皮细胞、等等....
细胞都是经过严格质量控制。
yb1455 rhNT-4 重组人神经营养因子-4 "Recombinant Human Neurotrophin-4
" 2μg
yb1456 rhCNTF 重组人睫状神经营养因子 "Recombinant Human Ciliary Neurotrophic Factor
" 5μg
yb1457 rhNRG-1 重组人 NRG-1(表皮生长因子样结构域) "Recombinant Human NRG-1(EGF-like domain)
" 10μg
yb1458 rhErbB3-f 重组人ErbB3片段 "Recombinant Human ErbB3 Fragment
" 5μg
yb1459 rhBTC 重组人乙胞素 "Recombinant Human Betacellulin
" 5μg
yb1460 rhBMP-2 重组人骨形成蛋白-2 "Recombinant Human Bone Morphogenetic Protein-2
" 2μg
yb1461 rhBMP-4 重组人骨形成蛋白-4 "Recombinant Human Bone Morphogenetic Protein-4
" 2μg
yb1462 rhBMP-7 重组人骨形成蛋白-7 "Recombinant Human Bone Morphogenetic Protein-7
" 2μg
yb1463 rhOPG-Fc 重组人骨保护素Fc融合蛋白 "Recombinant Human Osteoprotegerin/Fc Chimera
" 10μg
yb1464 rhNOGGIN 重组人NOGGIN蛋白 "Recombinant Human NOGGIN
" 5μg
yb1465 rhGH 重组人生长激素 "Recombinant Human Growth Hormone
" 20μg
yb1466
yb1467
yb1468
yb1469 rmGM-CSF 重组鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 "Recombinant Murine Granulocyte- Macrophage Colony Stimulating Factor
" 5μg
yb1470 rmTNF-α 重组鼠肿瘤坏死因子-α "Recombinant Murine Tumor Necrosis Factor-alpha
" 5μg
yb1471 rmLIF 重组鼠白血病抑制因子 "Recombinant Mouse Leukemia inhibitory factor
" 5μg
yb1472 rmbFGF 重组鼠成纤维细胞生长因子-碱性 "Recombinant Murine Fibroblast Growth Factor-basic
" 10μg
yb1473 rmFGF-7/KGF 重组鼠成纤维细胞生长因子-7 "Recombinant Mouse Fibroblast Growth Factor-7
" 2μg
yb1474 rmEGF 重组鼠表皮细胞生长因子 "Recombinant Murine Epidermal Growth Factor
" 100μg
yb1475 rmVEGF120 重组鼠血管内皮生长因子120
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