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荧光素标记的生物素
荧光素标记的生物素低于1.7,考虑RNA降解,最常见的原因是RNA酶去除不彻底。
建议你1.EP管和tip用DEPC水泡,如果来不及也可以买现成的。
2.提取时注意低温,防止RNA降解。
3.洗涤用的75%酒精用DEPC水配制,最后融解RNA的水也应是DEPC水,或去RNA酶水。
4.提取的RNA尽快转录成cDNA,-70度保存时间不宜过长(一般不超过一个月)。
荧光素标记的生物素提RNA提取秘诀:
1.提取RNA过程应该尽量快,不要太过仔细,以减少RNA的降解
2.在吸取上清液时要小心,离心管尽量不要抖动和倾斜,保持其从离心机里拿出来的角度吸取,加入异丙醇的那一步要尤其小心,上清液不要贪多
3.荧光素标记的生物素干燥时不要太过
4.你跑的电泳是不是普通的琼脂糖凝胶电泳?这个结果不是很准确,因为在跑胶的过程当中RNA也会降解,但并不一定你提取的RNA效果不好,一般情况下跑出来的电泳结果有3条带,2000bp,1000bp,100多的位置各有一条带,分别是28s,18s,5s,如果5S很亮,表示RNA降解
5.提完的RNA可以做反转录,荧光素标记的生物素然后用管家基因检测,只要能扩出明亮的条带即对你的实验没有影响。注意:在用管家基因检测时应增加循环数,以检测是否有DNA污染。
5000UXY120413核糖核酸酶H600UXY130675核糖核酸酶HII250UXY130637Tma 核酸内切酶 III500UXY130638核酸内切酶 IV1000UXY131228Tth 核酸内切酶 IV500UXY130640核酸内切酶 V250UXY130639核酸内切酶 III(Nth)1000UXY130642核酸内切酶 VIII1000UXY130635T7核酸内切酶 I250UXY130634人源脱嘌呤/脱嘧啶 (AP) 核酸内切酶1000UXY120410核酸外切酶 I750UXY120420核酸外切酶 III2500UXY130627核酸外切酶 T250UXY130628Lambda 核酸外切酶1000UXY130629RecJf 核酸外切酶1000UXY130632T7 核酸外切酶1000UXY130672核糖核酸酶RNase If10000UXY120414DNA 拓扑异构酶 I100UXY130651DNA 促旋酶(E. coli )100UXY130665Cre 重组酶50UXY81106蛋白酶K干粉100mgXY80911蛋白酶K溶液1.5mLXY131025胰凝乳蛋白酶,测序级25μgXY131026弹性蛋白酶5mgXY120508肠激酶(轻链)0.032μg|0.063μgXY120507Xa因子蛋白酶25μg|50μgXY130867Furin 蛋白酶50UXY131027胃蛋白酶250mgXY130876PreScissiom 蛋白酶100UXY130872SUMO 蛋白酶5μgXY130875葡激酶100μgXY131183链激酶100μgXY130873TEV蛋白酶300UXY120708凝血酶1000UXY131028嗜热菌蛋白酶25mgXY131029胰蛋白酶,质谱级100μgXY130868人二硫键异构酶1mgXY130869人超氧化物歧化酶10kuXY120623β-琼脂糖酶Ⅰ100U|500UXY100406溶菌酶干粉10gXY100815溶菌酶溶液1.5mLXY131017乙酰化牛血清白蛋白400μLXY130874人玻连蛋白100μgXY130870硫氧还蛋白5mgXY131021链霉亲和素1mgXY130818HRP标记链霉亲和素0.1mLXY131022碱性磷酸酶标记链霉亲和素0.5mLXY131085亲和素10mgXY131086HRP标记亲和素2mgXY131087碱性磷酸酶标记亲和素100mgXY131088荧光素(FITC)标记亲和素5mgXY131090中性亲和素蛋白10mgXY131092生物素1gXY131093荧光素标记的生物素5mgXY131094生物素化的牛血清白蛋白25mgXY131095生物素化的辣根过氧化物酶5mgXY131096生物素化的碱性磷酸酶(AP)1mgXY131098生物素化蛋白G0.5mgXY131099生物素化蛋白A1mgXY131101生物素化蛋白L0.5mgXY131102生物素化兔IgG5mgXY130661RecA蛋白200μg|1000μgXY130662Tth RecA 蛋白100μgXY130663T4 噬菌体基因 32 蛋白100μg|500μgXY130664极高热稳定单链结合蛋白50μg