Strep-Tactin Sepharose

Strep-Tactin Sepharose树脂技术指标：

Strep-Tactin浓度：	5 mg/ml 沉积树脂
结合容量：	1 ml沉积树脂可一步法纯化50-100 nmol 重组蛋白(多达3 mg 30 KDa蛋白质)
支持介质：	Sepharose 4FF, 4 % agarose
珠子大小	45 - 165 µm
线性流动速率：	重力流
排阻极限：	3 x 10⁷ Da
形式：	50 % 悬浮在100 mM Tris/HCl pH 8.0, 1 mM EDTA, 150 mM NaCl
稳定性：	室温运输后能保存至少6个月
保存：	4 °C，不能冻存
运输：	室温

相关产品：

目录号	产品说明	规格	供应商
2-1202-550	重力流Strep-Tactin Sepharose迷你柱（0.2 ml柱床体积）	5 柱	IBA
2-1202-001	重力流Strep-Tactin Sepharose柱（1 ml柱床体积）	1 柱	IBA
2-1202-050	重力流Strep-Tactin Sepharose柱（1 ml柱床体积）	5 柱	IBA
2-1202-051	重力流Strep-Tactin Sepharose柱（5 ml柱床体积）	1 柱	IBA
2-1202-101	重力流Strep-Tactin Sepharose柱（10 ml柱床体积）	1 柱	IBA
2-1201-002	Strep-Tactin Sepharose (50 %悬浮)	4 ml	IBA
2-1201-010		20 ml	IBA
2-1201-025		50 ml	IBA
2-1201-100		200 ml	IBA
2-1201-500		1000 ml	IBA

Strep-tag / Strep-Tactin系统现已成为最被广泛应用的亲和层析系统之一。

　　Strep-Tactin与多种不同的基质偶联，使Strep-tag融合蛋白得以在生理条件下亲和纯化。与其他tag相比，这些温和的纯化参数能保存蛋白质的生物活性，并仅经一步层析后即可产出超过99%的纯度。

　　Strep-tag®系统可用于从任何表达系统包括杆状病毒、哺乳动物细胞、酵母和细菌中纯化Strep-tag II蛋白。用于细菌、哺乳动物细胞和酵母的表达载体请参见本栏目相关章节。

　　除了表达载体，IBA还提供围绕Strep-tag用于蛋白质纯化、检测、分析（蛋白质固定）、蛋白质：蛋白质相互作用研究以及高通量纯化的完整的产品组合。

The tag

技术

蛋白质

仅8个氨基酸

平衡的氨基酸组成 – 对蛋白质的结构和活性一般没有影响

高选择性和易于控制的结合属性

C-或N-末端融合

无需去除

有效和通用的表达载体，标准化的克隆策略

生理条件下的亲和层析

通过颜色改变可见柱再生和活性状态（见下）

可获得超过99%的纯度

Strep-tag适用于：

金属蛋白

膜蛋白

具有多个亚单位的敏感蛋白质复合体

以及其他任何蛋白质

纯化在E. coli 中过度表达的GFP-Strep-tag II 融合蛋白

图片(从左至右)：1、GFP-Strep-tag II融合蛋白特异结合在Strep-Tactin Sepharose^Ò柱上，而非特异性蛋白质被少量生理性洗涤缓冲液迅速洗去。2、由于加入特异性竞争剂脱硫生物素，Strep-tag蛋白被洗脱。3-5、柱再生：脱硫生物素被黄色溶液HABA取代，后者一旦与Strep-Tactin复合即变为红色。HABA随后被洗涤缓冲液除去，柱子可被重新使用。

Strep-tag融合蛋白可以经Western blots, ELISA, 电子或荧光显微镜进行方便的检测。有相应的Strep-Tactin酶共轭物和抗Strep-tag II的单克隆抗体供出售。

Strep-tag^®II对蛋白质的影响可以忽略

　　此8个氨基酸的短肽tag由于具有化学平衡的氨基酸组成（WSHPQFEK），因此对重组蛋白的影响可以忽略不计。该tag可以被置于C-端或N-端。建议在蛋白和tag之间加入2个氨基酸的间隔以确保tag的可接近性。总的来说，该tag不干扰蛋白质的折叠或生物活性、不与重金属离子缓冲液杂质反应、无离子交换属性、不会诱导蛋白质聚集。因此无需去除该tag。

Strep-Tactin^®：长效的亲和柱

　　Strep-Tactin是streptavidin的一种衍生物，是已知最稳定的蛋白质之一。Streptavidin对以8 M urea或guanidine, 0.5 M NaOH以及50 % formamide (t = 1 h; T = 37 °C)的处理保持稳定。蛋白酶(胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶、嗜热菌蛋白酶和弹性蛋白酶等) 在1:50 w/w比例下，37 °C孵育2小时都无法切割 streptavidin。当SDS存在时，仅在温度高于60 °C时，streptavidin才开始降解成单体。经过测试，Strep-Tactin已经被证实具有上述作为长效亲和柱必备的卓越特性，可被重复使用3-5次。而且，Strep-Tactin的中性PI值使非特异性蛋白质或核酸的结合降到最低。