Hygromycin B 潮霉素B FS0012

Hygromycin B 潮霉素B

规格信息：

产品编号	产品名称	规格	价格（元）
FS0012-1G	Hygromycin B 潮霉素B（冻干粉）	1g	600.00
FS0012-5G	Hygromycin B 潮霉素B（冻干粉）	5g	2400.00
FS0012-10G	Hygromycin B 潮霉素B（冻干粉）	10g	3840.00
FS0012-10ML	Hygromycin B (50 mg/ml) 潮霉素B（50 mg/ml）	10ml	680.00
FS0012-20ML	Hygromycin B (50 mg/ml) 潮霉素B（50 mg/ml）	20ml	1050.00

性状/储存	-20℃保存（干粉），4℃保存（液体）

Hygromycin B 潮霉素B生物应用：

1）筛选和维持培养稳定转染Hph⁺载体的原核细胞或真核细胞（植物细胞和哺乳动物细胞）；

2）由于作用模式的差异，常与G418 (Geneticin^TM)，Zeocin™ 和blasticidin S联合使用，筛选稳定转染两个不同载体的细胞株；

双抗性稳定转染细胞筛选的抗生素作用机制及抗性
抗生素	抗性机制	抗性基因	哺乳动物筛选浓度
潮霉素B	干扰70S核糖体易位和诱导对mRNA模板的错读	Hph	200~500μg/mL
G418	干扰80S核糖体功能和抑制蛋白合成	Tn5/Tn601	100~1000μg/mL
Zeocin	掺入或者切割DNA引起细胞死亡	Sh ble	50~100μg/mL
blasticidin S	核糖体上抑制肽键形成	Bsd/BSD	3~50μg/mL

3）抗病毒剂，由于潮霉素B选择性渗透进入因病毒感染增强通透性的细胞，而且具有抑制翻译的功效；

4）作为驱虫药加入动物饲料；

Hygromycin B 潮霉素B应用浓度：

潮霉素B用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化。推荐使用浓度为50-1000 μg/mL，最佳浓度需要杀灭曲线来确定。

哺乳动物细胞·200-500 μg/mL；细菌/植物细胞·100-300 μg/mL；真菌·300-1000μg/mL；

Hygromycin B 潮霉素B产品使用：

使用一：杀灭曲线确定最佳杀死浓度（仅作参考，因个人检测体系而异）

（1）往组织培养级的96孔板内加入未转染细胞，细胞密度约50-200细胞/孔；细胞贴壁之后，往每孔加入含不同浓度（如50-1000μg/mL，至少5个浓度）潮霉素B的200μL新鲜培养基；

（2）37℃，5% CO₂培养箱孵育细胞10-14天；

（3）培养5-7天后更换新的培养液，培养液内含有相应浓度的潮霉素B；

（4）10-14天后使用细胞增殖方法如MTT，CCK-8等评估细胞活力；也可以通过检测细胞克隆数或百分比汇合率来确定毒性效应。一般选择在10-14天能够杀死所有细胞的最小浓度为最佳筛选浓度。

使用二：筛选稳定转染细胞

（1）对于贴壁细胞，直接吸去60mm培养皿内的转染细胞培养基，然后加入含有潮霉素B的新鲜培养基5-6ml；对于悬浮细胞，无菌条件250x g,离心10min除去旧的转染细胞培养基，然后悬浮在约5ml的含潮霉素B的新鲜培养基；

（2） 5-7天后，如上方法更换含有潮霉素B的新鲜培养基；

（3）再孵育细胞5-7天；

（4） 10-14天孵育后，培养体系中只含有能够表达潮霉素B抗性表型的活细胞。因此筛选之后如步骤一，更换不含潮霉素B的新鲜培养基。

基本属性

CAS号：31282-04-9

英文名称：Hygromycin B
分子式：C20H37N3O13
分子量：527.53
理化性质：
溶解性：水溶性
样品状态：溶液，50 mg/ml，缓冲液为PBS（phosphate-buffered saline），经过0.2 μm孔径滤膜过滤。
纯度：>98% (HPLC)
LD50：小鼠（i.v.）6 mg

；天竺鼠(i.p.) 13 mg

；大鼠 (i.p.) 63 mg

工作浓度：细胞培养中为50 - 1,000 μg/ml。哺乳动物细胞培养通常使用的浓度为200 μg/ml。但是，最适浓度必须通过实验确定，这需要根据细胞类型不同而改变