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产品名称: |
BCA蛋白浓度测定试剂盒 |
货号: |
0123 |
规格: |
500次 |
单价: |
288.00元 |
详细介绍: |
BCA蛋白浓度测定试剂盒 |
包装清单:
产品编号 |
产品名称 |
包装 |
0123-1 |
BCA试剂 A |
100ml |
0123-2 |
BCA试剂 B |
3ml |
0123-3 |
蛋白标准(5mg/ml BSA) |
1ml |
— |
说明书 |
1份 |
BCA试剂 A和B 在4℃保存,蛋白标准品在-20℃保存,本试剂盒自订购之日起一年内有效。
基本原理:
碱性条件下,蛋白将Cu2+还原为Cu+, Cu+与BCA试剂形成紫颜色的络合物,吸光度强度与蛋白浓度成正比。测定其在562nm处的吸收值,并与标准曲线对比,即可计算待测蛋白的浓度。
使用说明:
试管法
1. 配制工作液: 根据标准品和样品数量,按50体积BCA试剂A加1体积 BCA试剂B(50:1)配制适量BCA工作液,充分混匀。
2.稀释标准品:将标准品储存液稀释至25~2000ug/ml。
管号 |
稀释液体积 |
标准品体积 |
终浓度 |
A |
360ul |
240ul |
2000ug/ml |
B |
280ul |
120ul |
1500ug/ml |
C |
300ul |
300ul(从A管取) |
1000ug/ml |
D |
200ul |
200ul(从B管取) |
750ug/ml |
E |
300ul |
300ul(从C管取) |
500ug/ml |
F |
300ul |
300ul(从E管取) |
250ug/ml |
G |
300ul |
300ul(从F管取) |
125ug/ml |
H |
400ul |
100ul(从G管取) |
25ug/ml |
I |
300ul |
0ul |
0ug/ml(空白) |
微孔板法
1. 配制工作液(同上)
2. 稀释标准品(同上)
3. 将25ul的标准品和合适浓度范围的样本分别添加于96孔板的微孔中.
4. 各孔加入200ul BCA工作液,充分混匀。
5. 盖上96孔板盖,37℃孵育30分钟。
6. 冷却到室温,用酶标仪测定A562,根据标准曲线计算出蛋白浓度。
注意事项:
1. 在低温条件或长期保存出现沉淀时,可搅拌或37℃温育或微波几十秒使溶解, 如发现细菌污染则应丢弃。
2. 样品中若含有EDTA、EGTA、DTT、硫酸铵、脂类会影响检测结果,请试用Bradford蛋白浓度 测定试剂盒;高浓度的去垢剂也影响实验结果,可用TCA沉淀去除干扰物质。
3. 要得到更为精确的蛋白浓度结果,每个蛋白梯度和样品均需做复孔且标准品与样品处理要尽量一样(如采用同样的溶液溶解样品和标准品), 每次均应做标准曲线。
4. 当试剂A和B混合时可能会有浑浊,但混匀后就会消失。
5. 需准备37℃水浴或温箱、酶标仪或普通分光光度计,测定波长为540-595nm之间,562nm最佳。酶标仪需与96孔酶标板配套使用。使用分光光度计测定蛋白浓度时,试剂盒测定的样品数量会因此而减少。使用温箱孵育时,应注意防止因水分蒸发影响检测结果。
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- 询价产品:BCA蛋白浓度测定试剂盒 0123
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