非编码RNA：microRNA和lncRNA检测

非编码RNA：microRNA和lncRNA检测

非编码RNA是指不编码蛋白质的RNA，因其异常表达而与许多疾病发生密切相关，在细菌、真菌、哺乳动物等许多生物体的生命活动中发挥着极广泛的调控作用, 因此受到研究者的重视并成为热点研究领域。

目前用于非编码RNA研究的主要方法有转录组测序、Northern 印迹、实时荧光定量PCR技术、荧光原位杂交、RNA 干扰和 RNA 结合蛋白免疫沉淀等，而荧光定量PCR方法作为检测非编码RNA表达的金标准，其应用更是广泛。

关于microRNA

1.microRNA发现

1993年Lee等在秀丽新小杆线虫内首次发现非编码蛋白质但能时序调控其胚胎后期发育基因表达的小分子RNA:lin-4。2000年Reinhart等在对线虫的发育调控研究中发现第二种miRNA:Let-7，接着人们相继在细菌、果蝇、线虫、斑马鱼、动植物与人体内发现大量的miRNA编码基因，进一步研究证实MicroRNA主要通过调控其靶基因mRNA在转录后水平调控蛋白表达,最新有报道microRNA也能在转录水平调控基因表达。

2.microRNA作用机制

在细胞核内，由DNA转录生成pri-pre-microRNA被Drosha酶切割pri-pre-miRNA成形成长度大约70-100碱基的、具发夹结构的pre-microRNA。该前体RNA经核输出蛋白转运到细胞质，经Dicer酶切割形成成熟的miRNAs。成熟miRNA主要是以RISC（RNA-induced silencing complex）复合体形式结合于靶mRNA而发挥基因表达调控作用。