胎牛血清的应用
胎牛血清标准
一、胎牛血清
各项质量指标符合2005版《中华人民共和国药典》第三部附录的要求。
1、性状、外观 浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。
2、蛋白质含量 3.5%~5.0%( w/v)
3、血红蛋白含量 ≤ 0.02%( w/v)
4、无菌检验 阴性
5、支原体检验 阴性
6、细菌内毒素 ≤5(EU/ml)
7、牛腹泻病毒 阴性
8、大肠杆菌噬菌体 阴性
9、支持细胞增殖(Sp2/0-Ag14) 生长曲线(接种浓度)最大增殖浓度≥2.5×106 个/ml
细胞倍增时间 ≤15h
克隆率 ≥85%
血清的主要成分:
血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。
血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。
胎牛血清应取自剖腹产的胎牛;新牛血清取自出生24小时之内的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。
显然,胎牛血清是品质最高的,因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分最少。
胎牛血清的功能:牛血清是细胞培养中用量最大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份,常用于动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能。
1.提供对维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。
2. 提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,能结合或调变它们所结合的物质活力。
3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解毒作用。
4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。
5.起酸碱度缓冲液作用。
6.提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。
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