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六大类细胞培养基介绍

2013/8/26 15:25:52

一、低血请培养基
低血请细胞培养基在人们和兽用的疫苗生产中的应用起到很大的效果和重要的意义。
细胞培养基是疫苗生产用的重要原材料之一，其组成成分都是由化学结构已知的原料药或者试剂构成。血清用量的减少，必然要求有能够支持细胞适应低血清生长的培养基。低血清细胞培养基可以将血清用量降到较低水平，实现细胞低血清培养，从而减少因大量使用血清对疫苗制品造成的安全性风险。
与传统的高血清含量细胞培养相比，采用低血糖细胞培养具有提高疫苗制品的质量、提高企业生产效率、降低企业综合成本的优势。

二、无血清培养基
  无血清培养基是不需要添加血清就可以维持细胞在体外较长时间生长繁殖的合成培养基。
无血清培养基和试剂被广泛的应用于培养哺乳动物和无脊动物细胞以制备单克隆抗体，病毒抗原和重组蛋白等。大多数的无血清产品含有向细胞内转运离子的转铁蛋白和调节葡萄糖摄取量的胰岛素，以及一些蛋白质如清蛋白，纤连蛋白，胎球蛋白等，这些蛋白在细胞培养中发挥各种不同功能，如吸附毒性化合物，抗生物反应器剪切力，提供细胞贴壁所需的基质，作为脂类和其他生长因子的载体等。

三、无动物成分培养基
  细胞生长速度与含血清培养基相当。
无动物成分培养基的特点是低蛋白质含量（ < 5 ug/ml）、不含任何动物或人类来源的物质、内含物完全由纯物质调配而成，不含混合物、不含植物萃取物，酵母萃取物，肉汁萃取物，或其他复杂的混合物、同时提供贴附型与悬浮型细胞培养细胞生长与蛋白质表现的表现优于市售的培养基产品。

四、干细胞培养基
  大部分情况下，培养基是根据干细胞的来源而设计的，如胚胎、神经或造血。
在选择干细胞培养基时，要考虑干细胞的潜在应用、细胞所需的培养基组分，以及培养基的可靠性和质量。必须记住，它要能实现干细胞状态下的细胞扩增，同时又不会损害其分化能力。如果有多个培养基满足要求，那么再考虑使用的简单程度以及成分是否确定。对于干细胞的培养而言，成分明确的培养基无疑是最佳方案。无血清、成分明确的培养基通常包含重组的成分，而不是经过纯化的成分，这样就确切地知道里面有什么。这种培养基变化极少，不像含血清的培养基有着明显的批间差异。因此，实验结果也会更加一致。

五、无酚红细胞培养基
199培养基为含酚红，无酚红和无血清培养基三种。
1950年Morgan等人首次发表了人工综合的199细胞培养基，用于鸡胚组织细胞的培养。虽然培养基不能增加组织细胞的数量，但对病毒的培养有着很好的作用。人工综合细胞培养基具有成份明确，稳定不变等优于天然培养基的特点，成为现代细胞培养的重要手段，广泛应用于药物生产中的细胞培养和疫苗生产。
使用方法：199细胞培养基和无酚红粉末培养基称取9.9克，溶于1000ml新鲜双蒸水中，而后用NaHCO3 调节pH到7.1- 7.4，加入添加物后除菌过滤，即可使用。199无血清培养基12.1克溶于1000ml新鲜双蒸水中，而后用NaHCO3 调节pH到7.1-7.4，除菌过滤后即可使用。

六、经典培养基（植物）
培养基是植物组织培养的重要基质。
在离体培养条件下，不同种植物的组织对营养有不同的要求，甚至同一种植物不同部位的组织对营养的要求也不相同，只有满足了它们各自的特殊要求，它们才能很好地生长。因此，没有一种培养基能够适合一切类型的植物组织或器官，在建立一项新的培养系统时，首先必须找到一合适的培养基，培养才有可能成功。

母液的配制方法：

•单配法：将培养基配方中的各种成分分别配成一定浓度的母液。一般用a:b表示，即每b毫升溶液中含有a毫克溶质。

•混配法：将几类营养成分按配方中的用量扩大一定倍数称量，分别溶解后每一类混合在一起定容到一定体积配成混合母液，浓度可用a mg/L表示，即配制一升培养基吸取该母液a ml.

•生长素配制时可先用少量95%酒精助溶。2，4—D可用0.1mol／L的NaOH或KOH助溶，加入温水定容。生长素常配成1mg／ml的溶液贮于冰箱中备用。

•细胞分裂素类一般先用少量1N盐配溶解后，再加入温水冷却后定容，

•铁盐配法（MS为例）：在装有400ml 蒸馏水的烧杯中加入2粒苛性钠，溶解后加入3.73g EDTA-Na2，加热使其全部溶解，然后边搅拌边慢慢加入2.78g FeSO4.7H2O直至全部溶解，冷却后定容至500ml，置于冰箱中备用。

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