应用范围： 本方法采用二手高效液相色谱法分析青霉素含量。

　　本方法适用于注射用青霉素钠。

　　方法原理： 供试品经水溶解并定量稀释，进入二手高效液相色谱仪法进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长225nm处检测青霉素钠的峰面积，计算出其含量。

　　试剂：

　　1. 乙腈

　　2.磷酸

　　3. 0.1mol/L磷酸二氢钾溶液

　　仪器设备： 1. 仪器

　　1.1 二手高效液相色谱仪

　　1.2 色谱柱

　　十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按青霉素钠峰计算应不低于1600。

　　1.3 紫外吸收检测器

　　2. 色谱条件

　　2.1 流动相：0.1mol/L磷酸二氢钾溶液(用磷酸调节pH值至2.5) 乙腈=70 30

　　2.2 检测波长：225nm

　　2.3 柱温：室温

　　2.4 流速：1mL/min

　　试样制备：

　　1. 对照品溶液的制备

　　精密称取青霉素对照品适量，加水溶解并定量稀释制成每1mL中约含0.5mg的溶液，摇匀，即为对照品溶液。

　　2. 供试品溶液的制备

　　精密称取供试品装量差异项下的内容物适量，加水溶解并定量稀释制成每1mL中约含0.5mg的溶液，摇匀，即为供试品溶液。

　　注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

　　操作步骤： 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10mL，注入二手高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长225nm处测定，其结果乘以1.0658，即为供试品中C16H18N2O5S的含量。每1mg的C16H17N2NaO4S相当于1670青霉素单位。