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一、条件性恐惧实验注意事项
1.动物对电击的反应部分地取决于非条件刺激的电击强度和痛#。当动物(尤其是基因改变的动物,如转基因或基因敲除小鼠)不能学会关联条件反射时,可能是电击强度不够或痛#偏高所致。对条件反应程度与电击强度进行比较分析,可排除对电击强度因素的疑虑;对刺激电流强度(0.1~0.7mA)与反应作一“量-效曲线”,可评价动物的痛#或对电击的敏感性。此外,格栅地板若沾有动物的排泄物也可改变电刺激强度。因此,应保持格栅地板的清洁与干燥。
2.由于老年动物听力减弱甚至丧失,对听觉暗示可能反应迟钝或无反应。此外,有些品系的小鼠,即使在成年早期,对高频音刺激的反应尤其减弱。因此,用这一模型测定老年动物或某些品系的小鼠时应特别谨慎,并避免用高频音刺激。
3.要使动物在关联测试中表现凝滞行为,必须让其在操作箱内有适当的时间。应避免将动物放入箱内便立即给予电刺激,因为这样动物没有时间在电击与箱内环境(关联)之间形成联系。
4.观察者必须快速、准确地判定动物是否表现凝滞行为,而不应在整个10s观察期间死盯着动物,以免动物在这10s间隙活动而导致计分不准。不同观察者应用同一种方法计分,两名观察者计分之间的相关系数应在0.98以上。同样地,当采用自动计分系统进行计分时,应对系统进行调节,使之与人工方法计分相比,两者的相关系数在0.98~1之间。
5.在本实验中,先测试关联学习,再测试暗示条件反应。在关联测试中没有听觉暗示刺激,因此,动物在暗示条件测试时对听觉刺激的反应有可能发生消退(extinction)。理论上,这种听觉暗示反应可能减弱。为消除这种实验偏差,将其中一半动物先测试听觉暗示反应,一小时后再检查关联条件反应。
6.实验分两天进行。训练和测试应在每天的同一时间进行。测试(凝滞计分)所花的时间比训练要长的多,因此,同一批训练的动物不宜过多。
7.暗示和关联两种条件恐惧可表现出发育差异和基因差异。例如,年龄在18天的大鼠有听觉条件恐惧,但极少有关联条件恐惧;而到23天时,关联和听觉暗示条件恐惧都有。有些品系的小鼠(如DBA/2小鼠)只有很弱的关联条件恐惧,但听觉条件恐惧却很好。
8.对有些基因型动物,如果预先让其短暂适应关联条件,关联学习会得到改善。一般认为这与海马功能增强有关。这种适应通常在训练前一天进行,而且时间很短(30~60s)。
9.暗示条件恐惧由侧杏仁核调节,而关联条件恐惧由杏仁核和海马共同介导。毁损这些脑区可削弱或阻断暗示与关联恐惧条件反射。