摘要：磷存在与人体所有细胞中，是维持骨骼和牙齿的必要物质，几乎参与所有生理上的化学反应。磷还是使心脏有规律地跳动、维持肾脏正常机能和传达神经刺激的重要物质。

      一、前沿掌握比色法测定土壤速效磷的方法，了解土壤中磷素形态及其土壤供磷能力与土壤速效磷的关系。掌握土壤速效磷的浸提，浸提液的处理，标准曲线制作，显色，比色，计算。

      二、内容与原理酸性土壤中的磷主要是以Fe—P，A1—P的形态存在，利用氟离子在酸性溶液中络合Fe3 和Al3 的能力，可使这类土壤中比较活性的磷酸铁铝盐被陆续活化释放，同时由于H 的作用，也能溶解出部分活性较大的Ca—P，然后用钼锑抗比色法进行测定。

      三、主要仪器及试剂配制仪器：塑料杯，往复式振荡机，分光光度计或光电比色计试剂： （1）0.03molL-1NH4F—0.025 molL-1HCl浸提剂称取1.11克NH4F溶于800毫升水中，加1.0molL-1HCl25毫升，然后稀释至1升，贮于塑料瓶中，其它试剂同前法。

      （2）钼锑抗试剂 称取酒石酸锑钾（KSbOC4H4O6）0.5克，溶于100毫升水中，制成5％的溶液。

      另称取钼酸铵20克溶于450毫升水中徐徐加入208.3毫升浓硫酸，边加边搅动，再将0.5％的酒石酸锑钾溶液100毫升加入到钼酸铵液中，最后加至1升，充分摇匀，贮于棕色瓶中，此为钼锑混合液。

       临用前（当天）称取1.5克左旋抗坏血酸溶液于100毫升钼锑混合液中，混匀。此即钼锑抗试剂。（有效期24小时，如贮于冰箱中，则有效期较长。）

       （3）磷标准溶液称取0.439克KH2PO4（105℃烘2小时）溶于200毫升水中，加入5毫升浓H2SO4，转入1升量瓶中，用水定容，此为100 mgkg-1磷标准液，可较长时间保存。取此溶液稀释20倍即为5 mgkg-1磷标准液，此液不宜久存。

      四、操作方法与实验步骤1、称取通过1毫米筛孔的风干土样品5克（精确到0.01克）于150毫升塑料杯中，加入0.03molL-1NH4F—— 0.025 molL-1HCl浸提剂50毫升，在20—30℃条件下振荡30分钟，取出后立即用干燥漏斗和无磷滤纸过滤于塑料杯中，同时作试剂空白试验。

       2、吸取滤液10—20毫升于50毫升容量瓶中，加入10毫升0.8M H3BO3，再加入二硝基酚指示剂2滴，用稀HCl和Na0H液调节pH至待测液呈微黄，用钼锑抗试剂5毫升显色，并用蒸馏水定容，摇匀，在室温高于15℃的条件下放置30分钟，用红色滤光片或660nm波长的光进行比色，以空白溶液的透光率为100（即光密度为0），读出测定液的光密度，在标准曲线上查出显色液的磷浓度（mgkg-1）。

      3、标准曲线制备：吸取含磷（P）5mgkg-1的标准溶液0、1、2、3、4、5、6毫升，分别加入50毫升容量瓶中，加入10毫升0.8M H3BO3，再加入二硝基酚指示剂2滴，用稀HCl和Na0H液调节pH至待测液呈微黄，再加入钼锑抗显色剂5毫升，摇匀，定容即得0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6 mgkg-1磷标准系列溶液，与待测溶液同时比色，读取吸收值，在方格座标纸上以吸收值为纵座标，磷mgkg-1数为横座标，绘制成标准曲线。

      五、作业根据以下公式计算土壤中速效磷的含量 显色液磷mgkg-1数×显色液体积×分取倍数 土壤中速效磷mgkg-1＝—————————————————――――――――————————— 烘干土重（克）

       显色液磷mgkg-1数：从工作曲线查得显色液的磷mgkg-1数 显色液体积：50毫升 浸提液总体积（50毫升）

      分取倍数＝————--------————————— 吸取浸出液毫升数六、参考指标 土壤速效磷 　 mgkg-1等级 ＜3 很低 3—7 低 7—20 中等 >20 高