实验原理
各种菌对氧的要求是不同的,根据它们对氧的要求或所能耐受的量可将细菌分为四个类型。专性好氧菌必须在有氧的情况下生存,例如枯草芽孢杆菌;专性厌氧菌则要求在完全无氧的条件下生长繁殖,分子氧对它们有害,例如破伤风梭菌(Clostridiumtetani)、丙酮丁醇梭菌(C.acetobutylcum)等;兼性厌氧菌无论在有氧或无氧的情况下均能生长,一般在有氧情况下生长快,例如酵母菌、肠道杆菌等属于兼性厌氧菌;微好氧菌适宜于在氧浓度较低的环境中生长,例如链球菌属中的个别种。
本实验采用深层琼脂法来测定氧对细菌生长的影响,在葡萄糖牛肉膏蛋白胨琼脂培养基试管中接入某种细菌,通过适宜的培养条件,若细菌只生长在培养基表面,则为好氧菌;只生长在培养基底部,为厌氧菌;若表面及全部培养基中都生长,为兼性厌氧菌;生长在培养基中上部,为微好氧菌。这样,根据细菌在试管培养基中生长的部位,就可以判断各种细菌对氧的需要程度。
实验试剂
肉膏蛋白胨琼脂试管培养基4支。
实验材料
大肠杆菌,枯草芽孢杆菌,丙酮丁醇梭菌;
实验步骤(氧对微生物的影响)
1.将肉膏蛋白胨琼脂培养基试管置于水浴锅中加热溶化。
2.待培养基冷却至50℃左右时,按无菌操作分别用接种环接种大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、丙酮丁醇梭菌各一环于试管培养基中,另一支试管中不接种作对照。搓动试管,使细菌均匀混于培养基内。
3.待凝固后,置于28℃温室中培养48小时后开始观察,连续观察几天,直至结果清晰时为止。
记录氧对细菌的影响于下表中。生长情况用表面生长、底部生长、表面及全部培养基部生长表示。